Как проводится и что показывает иммуноферментный анализ?

Метод лабораторной диагностики, основанный на взаимодействии "антиген-антитело" называется иммуноферментным анализом (ИФА). Это позволяет выявлять белковые вещества, такие как ферменты, вирусы, фрагменты бактерий и другие компоненты биологических жидкостей. В настоящее время современная диагностика невозможна без ИФА и других высокочувствительных лабораторных анализов.

В прежние времена врачи вынуждены были опираться на косвенные признаки болезни и проводить длительные микроскопические исследования в целях определения возбудителя инфекции. Сегодня всего один тест, такой как иммуноферментный анализ, может подтвердить или опровергнуть первоначальный диагноз, что значительно облегчает процесс диагностики.

Осмысление метода иммуноферментного анализа возможно благодаря пониманию реакции «антиген — антитело». Непригодные для организма молекулы, зачастую белкового происхождения, которые могут попасть в инфицированный организм, называются антигенами. Кроме того, частицы крови, не совпадающие с собственной группой, также могут являться антигенами. В свою очередь, антигены могут вызвать иммунную реакцию, направленную на защиту внутренней среды человека от неизвестных веществ. Процесс реакции «антиген — антитело» заключается в синтезе антител (иммуноглобулины) организмом, которые могут связаться с антигеном, образовав иммунный комплекс. Клетки иммунной системы легче распознают такие комплексы и уничтожают их.

Анализированные показатели

Наличие или отсутствие определенных классов иммуноглобулинов может быть ключевым фактором в оценке состояния организма в отношении инфекционных процессов. В этом контексте следующие показатели следует учитывать:

• IgM: Если обнаружены IgM, это свидетельствует об остром инфекционном процессе в организме. Отсутствие IgM может указывать на отсутствие конкретного возбудителя в организме, а также на переход инфекции в хроническую стадию.
• IgA: Если тест на IgM дает отрицательный результат, а IgA обнаруживается, это чаще всего свидетельствует о хронической или скрыто протекающей инфекции, или же о реинфекции.
• IgM и IgA: Обнаружение обоих классов иммуноглобулинов означает разгар острой фазы заболевания.
• IgG: Появление IgG говорит либо о хронической форме заболевания, либо о выздоровлении и выработке иммунитета к инфекционному агенту.

Таким образом, анализ этих показателей может стать важным вкладом в определение состояния здоровья человека в отношении инфекционных заболеваний и помочь в проведении соответствующего лечения.

Возможные результаты ИФА

Отчетливые данные, отображаемые в виде таблицы, являются частой формой представления результатов анализа ИФА. Эти данные могут включать в себя перечисление всех антител или антигенов, с указанием результатов теста, отрицательных или положительных. Они также могут содержать количественный показатель, который указывает на количество антител в образце. Такой показатель может быть отрицательным, слабоположительным, положительным или резко положительным.

Еще один количественный показатель - индекс авидности антител, выраженный в процентах. Если индекс выше, это указывает на то, что инфекционный процесс длится дольше.

ИФА – это один из тех анализов, которые помогают, при самых разных патологиях, обнаружить специфические антитела и антигены. Существует тысячи различных видов тест-систем ИФА, поэтому этот метод используется в большинстве медицинских отделений. Результаты ИФА позволяют определить правильный диагноз и назначить оптимальную терапию, что обеспечивает эффективное лечение заболевания.

Классификация антител и их роль в иммунном ответе

Антитела являются важной частью иммунной системы человека. Они играют ключевую роль в противостоянии инфекционным заболеваниям, благодаря способности связываться с антигенами - веществами, вызывающими иммунный ответ. Существует несколько видов антител, каждое из которых активизируется на своей стадии иммунного ответа.

Первыми проявляются иммуноглобулины класса M (IgM) - самые крупные молекулы антител. Их содержание в крови резко возрастает на ранней стадии инфекции. За ними следует появление иммуноглобулинов класса G (IgG), которые помогают к организму начать уничтожение антигенов, а также продолжают циркулировать после болезни, обеспечивая иммунитет от повторного заражения.

Кроме того, в состав антител входят иммуноглобулины класса A (IgA), которые находятся в большом количестве в слизистых оболочках организма и представляют собой первую линию защиты от инфекций, а также иммуноглобулины класса E (IgE), которые играют важную роль в борьбе с паразитарными инфекциями и аллергическими реакциями.

Для лабораторной диагностики в основном используются IgM, IgG и IgA. Концентрация каждого из этих видов антител позволяет судить о том, на какой стадии находится инфекционный процесс и было ли у человека ранее данное заболевание (к примеру, краснуха или ветряная оспа). Благодаря прививкам, которые содержат ослабленные антигены микробов и вирусов, появляется большое количество IgG в крови, что при контакте с реальной угрозой быстро подавляет инфекцию до того, как она нанесет вред здоровью.

Иммуноферментный анализ, или ИФА, назначается врачами, если они подозревают определенную инфекцию или если нужно измерить концентрацию определенного гормона. Он помогает определить, какие антигены или антитела присутствуют в организме человека.

Лаборатория использует пластиковые планшеты с лунками, в которых уже содержатся очищенные антигены предполагаемого возбудителя (или антитела, если нужно найти антиген). Образец биологической жидкости (обычно это сыворотка крови) вводится в лунки. Затем происходит или не происходит образование иммунных комплексов. Если «встреча» состоялась, особое красящее вещество вступает в ферментную реакцию с объединенной молекулой, что позволяет с помощью инструментальной оценки оптической плотности сделать вывод о результате анализа.

ИФА может быть качественным и количественным. В первом случае ответ будет однозначным: либо искомое вещество найдено, либо нет. В случае количественного анализа цепь реакций дает возможность оценить концентрацию антител в крови человека. Это поможет понять, как развивается инфекционный процесс.

Предшественником иммуноферментного анализа был радиоиммунный анализ, в котором для идентификации успешной реакции использовались меченые антитела и антигены. Однако, проведение такой диагностики представляло потенциальную угрозу для здоровья сотрудников лаборатории. В 1971 году учеными был изобретен ИФА, который оказался безопасным альтернативным способом идентификации реакции.

Какие преимущества у метода ИФА?

Метод ИФА (иммуноферментный анализ) – это эффективный и чувствительный метод диагностики многих заболеваний, который позволяет точно идентифицировать антитела или антигены в крови. Он имеет множество преимуществ перед другими методами диагностики.

Высокая чувствительность. Одним из основных преимуществ метода ИФА является его высокая чувствительность. Это значит, что метод позволяет распознать искомое вещество, даже если его концентрация в образце невысока.

Высокая специфичность. Ещё одним преимуществом ИФА является его высокая специфичность. Это означает, что метод позволяет производить диагностику без ошибок. Если результат положительный, значит, найдены именно те антитела или антигены, которые предполагались, а не какие-то другие.

Возможность определить заболевание на ранней стадии. Одним из главных преимуществ метода ИФА является возможность определить заболевание на ранней стадии. Метод ИФА во многом заменил золотой стандарт микробиологии – бактериологический метод диагностики. Благодаря ИФА, для идентификации возбудителя достаточно обнаружить IgM-антитела в крови. Это значительно повышает точность диагностики и позволяет начать лечение на ранних этапах болезни.

Низкая вероятность ошибки. В методе ИФА снижается вероятность ошибки благодаря высокой степени технологичности проведения анализа, минимизирующей влияние человеческого фактора. Большинство используемых в современных лабораториях тест-систем и реактивов для ИФА выпускаются в промышленных условиях, что гарантирует точный результат.

Метод ИФА, несмотря на его точность, имеет некоторые недостатки. Для его проведения необходимо знать, что именно искать - врач должен иметь представление о характере заболевания. Поэтому случайный тест в надежде на угадывание диагноза не имеет смысла.

Кроме того, при диагностировании инфекционных заболеваний иммуноферментный анализ не может обнаружить возбудителя и определить его конкретные свойства. Он только указывает на наличие антител в крови у пациента, что косвенно свидетельствует о наличии чужеродного микроорганизма в организме.

Стоит отметить, что ИФА является достаточно точным, но не самым дешевым методом диагностики. Поэтому использование метода должно быть обоснованным, а интерпретацией результатов должен заниматься опытный врач.

Назначение и обнаружение заболеваний с помощью ИФА анализа имеет множество показаний, особенно для диагностики инфекционных заболеваний, аутоиммунных заболеваний и определения уровня гормонов в крови. Некоторые из многочисленных целей анализа включают:

• Диагностика острых и хронических инфекционных заболеваний:
• IgM и IgG к вирусным гепатитам A, B, C, D и E;
• IgG к ВИЧ;
• IgM и IgG к цитомегаловирусной инфекции;
• IgM и IgG к вирусу Эпштейна — Барр;
• IgM и IgG к герпетическим инфекциям;
• IgM и IgG к токсоплазмозу;
• IgM и IgG к кори, краснухе, сальмонеллезу, дизентерии, клещевому энцефалиту и другим заболеваниям;
• IgG к паразитарным заболеваниям;
• IgM и IgG к инфекциям, передающимся половым путем;
• IgG к хеликобактерной инфекции.
• Оценка присутствия маркеров некоторых аутоиммунных заболеваний.
• Обнаружение онкологических маркеров, таких как простатспецифический антиген, раково-эмбриональный антиген и другие.
• Определение содержания гормонов в сыворотке крови, таких как прогестерон, пролактин, тестостерон, тиреотропный гормон и другие.

Основным материалом для проведения иммуноферментного анализа (ИФА) является сыворотка крови. Для получения образца крови, который будет использован в лаборатории для проведения анализа, необходимо взять его из вены у пациента. Далее, из полученного образца удаляют форменные элементы, которые могут помешать проведению анализа. Однако, иногда для анализа могут использоваться и другие материалы, такие как спинномозговая жидкость, околоплодные воды, мазки слизистых оболочек и т.д.

Для получения точных результатов рекомендуется сдавать кровь натощак, а также за две недели до исследования (если целью является диагностика хронических, скрыто протекающих инфекционных заболеваний) необходимо отказаться от принятия антибиотиков и противовирусных препаратов. Как правило, соблюдение этих рекомендаций помогает избежать искажений в результатах анализов.

Как быстро получить результаты ИФА?

Для того чтобы получить результат анализа ИФА (иммунноферментного анализа) необходимые реактивы и хорошо организованная работа в лаборатории. Обычно результат может быть готов в течение одного или двух суток после взятия крови. Если требуется получить экстренный ответ, то в некоторых случаях время ожидания может быть сокращено до двух или трех часов.

Расшифровка результатов иммуноферментного анализа (ИФА)

Иммуноферментный анализ (ИФА) является методом исследования биоматериала, который позволяет выявить наличие или отсутствие искомого вещества в образце, а также его количество (при количественном анализе).

Качественный ИФА дает однозначный ответ: вещество либо найдено, либо нет в образце. В случае количественного анализа, концентрация вещества может быть выражена числом или количеством знаков «+» (от одного до нескольких).

Фото: freepik.com